Определения эффективных концентраций комплексных пептидов при культивировании различных тканей

Для выявления эффективных концентраций каждого из комплексных препаратов пептидов производилось культивирование тканей, от 1-дневных, 21-дневных и 24-месячных животных, с добавлением в каждую культуру соответствующего препарата в диапазоне концентраций 0,1-400 нг/мл. В последующих опытах использовались эффективные концентрации каждого препарата, как для исследования соответствующей ткани, так и при изучении действия данного препарата на другие ткани. Таким образом, если в отношении, например, коры головного мозга эффективная концентрация кортексина была 100 нг/мл, то эта же концентрация кортексина применялась и в культурах ткани тимуса, сердца и т. д. В 1-е сутки культивирования происходило распластывание эксплантатов на коллагеновой подложке и начиналось выселение пролиферирующих и мигрирующих клеток по периферии эксплантата. Через 3 суток, если в эксперименте происходила стимуляция развития зоны роста, состоящей из монослоя мигрирующих и пролиферирующих клеток, ИП экспериментальных эксплантатов увеличивался по сравнению с ИП контрольных эксплантатов. В случаях замедления или угнетения развития зоны роста ИП эксплантатов понижался по сравнению с контрольными значениями И П.

В развитии зоны роста культивируемых в органотипической культуре фрагментов тканей, как известно, играют роль пролиферационные и миграционные процессы в клеточных популяциях, а также адгезивные способности различных типов клеток.


В данной работе учитывался суммарный эффект всех этих составляющих, выражающийся в размерах развивающейся зоны роста эксплантатов. В каждой из серий экспериментов зона роста однотипно изменялась под влиянием какого-либо одного из пептидов. Поэтому было возможно судить о направленности — стимулирующей или ингибирующей — исследуемых пептидов. При введении в культуральную среду эксплантатов коры головного мозга кортексина в различных концентрациях выявлено, что эффективной концентрацией, т. е вызывающей максимальную стимуляцию зоны роста — на 29+5% (я= 15, р<0,05), выше, чем в контроле (и=18), — была концентрация 100 нг/мл. При других дозах кортексина, вводимого в культуральную среду, ИП зоны роста был сопоставим с ИП в контрольных эксплантатах. При раститровке эпиталамина наблюдалось два пика стимулирующей зону роста активности: при концентрации 20 нг/мл — на 25+3 % (я=17,р<0,05) выше контрольных значений ИП (и=15), при концентрации 200 нг/мл - на 29+3%.

У простатилена активность препарата наблюдалась при концентрации 50 нг/мл, однако при этом происходило ингибирование зоны роста, что связано с активацией реакции апоптоза в ткани предстательной железы от 1-дневных животных (аналогично действию ти-мусных пептидов на ткань тимуса 1-дневных крыс), что будет обсуждаться ниже.


У старых животных простатилен вызывал в этой же концентрации статистически достоверное увеличение зоны роста по сравнению с контролем. При культивировании эксплантатов ткани сердца эффективной концентрацией была доза кардиалина 50 нг/мл, приводящая к увеличению ИП зоны роста на 45+5 % (п= 19,/?<0,05) по сравнению с контролем (я=15).

Эффективная концентрация для ретиналамина, определяемая в культуре ткани сетчатки глаза 10-дневного эмбриона цыпленка, была 1 нг/мл. При этом происхлдила стимуляция зоны роста эксплантатов и ИП увеличивался на 23+5% (я=21, р<0,05) по сравнению с ИП контрольных эксплантатов (п=20). При более высоких концентрациях ретиналамина — 200-400 нг/мл — могло происходить уже ингибирование зоны роста, т. е. в кривой дозозависимости наблюдалась реверсия знака реакции, как это будет обсуждаться ниже при рассмотрении действия малых доз биологически активных веществ в культуре ткани. Весьма активным пептидом оказался тималин. В культуре ткани 1-дневных и 21-дневных животных он вызывал статистически достоверную стимуляцию ИП зоны роста в большом диапазоне концентраций — от 0,1 нг/мл до 100 нг/мл.


Тималин в концентрациях 5, 50 и 100 нг/мл вызывал резкую стимуляцию развития ткани вилочковой железы, что приводило к увеличению ИП эксплантатов соответственно на 91+5% (я=20,р<0,05), 68+5% (я=18,р<0,05) и 56+7% (я=21, р<0,05) в эксплантатах от 1-дневных животных по сравнению с контрольными значениями ИП (я=22). В качестве эффективной концентрации использовали 5 нг/мл, которая, например, в эксплантатах от 21-дневных животных приводила к увеличению ИП зоны роста эксплантатов на 200+15% (и=23, р<0,05) выше контрольного значения ИП (я=20).


Оцените статью: (14 голосов)
4.07 5 14
2007-2017 © Copyright ООО «МЕДКАРТА». Все права на материалы, находящиеся на сайте medkarta.com,
охраняются в соответствии с законодательством РФ, в том числе, об авторском праве и смежных правах.